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生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)常用試劑的配制方法

更新時(shí)間:2019-05-10  |  點(diǎn)擊率:1160

        1、0.5mol/L氫氧化鈉溶液 □組份濃度 0.5mol/L □配制量 2L □配置方法 1.準(zhǔn)確稱(chēng)取氫氧化鈉40g。 2.用去離子水溶解并稀釋至2L。

 

        2、0.5mol/L鹽酸溶液 □組份濃度 0.5mol/L □配制量 2L □配置方法 1.準(zhǔn)確量取鹽酸83.4mL。 2.用去離子水稀釋至2L。

 

        3、含 0.5mol/L氯化鈉的 0.5mol/L氫氧化鈉溶液 □組份濃度 0.5mol/L氯化鈉、0.5mol/L氫氧化鈉 □配制量 1L □配置方法 1.準(zhǔn)確量取氯化鈉29.3g。 2.準(zhǔn)確量取氫氧化鈉20g。 3.用去離子水稀釋至1L。 注意:此溶液供回收纖維素時(shí)使用。

 

        4、0.2%葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液 □組份濃度 0.2% □配制量 1L □配置方法 1.稱(chēng)取葡萄糖2.5g置于稱(chēng)量瓶中,在鼓風(fēng)干燥箱內(nèi)70℃干燥2小時(shí)。 2.干燥器中冷卻至室溫,重復(fù)干燥,冷卻至恒重。 3.準(zhǔn)確稱(chēng)取葡萄糖2.000g。 4.用去離子水溶解并定容至1L 5.于4℃保存。

 

        5、250μg/mL牛血清白蛋白標(biāo)準(zhǔn)液 □組份濃度 250μg/mL □配制量 2L □配置方法 1.準(zhǔn)確稱(chēng)取250mg標(biāo)準(zhǔn)牛血清白蛋白。 2.用0.03mol/LpH7.8的磷酸緩沖液溶解并定容至1L。 3.4℃保存。

 

        6、Folin試劑甲 □配置方法 1.稱(chēng)取10g氫氧化鈉溶于400mL去離子水中,加入50g無(wú)水碳酸鈉,溶解,待用。2.稱(chēng)取0.5g酒石酸鉀鈉,溶于80mL去離子水中,加入0.25g硫酸銅?5水,溶解。3.將1:2:去離子水按20:4:1的比例混合即可。 4. 4℃保存,可用一周。

 

        7、Folin試劑乙 □配置方法 1.在500mL的磨口回流裝置內(nèi)加入鎢酸鈉?2水25.0359g, 鉬酸鈉?2水6.2526g,去離子水175mL,85%磷酸12.5mL, 濃鹽酸25mL,充分混合。 2.回流10小時(shí),再加硫酸鋰37.5g,去離子水12.5mL及數(shù)滴溴。 3.然后開(kāi)口沸騰15min,以驅(qū)除過(guò)量的溴,冷卻后定容到250mL。 4.于棕色瓶中保存,可使用多年 注意:上述制備地Folin試劑乙地貯備液濃度一般在2mol/L左 右,幾種操作方案都是把Folin試劑乙稀釋至1mol/L的 濃度作為應(yīng)用液,我們這時(shí)是把貯備液于使用前稀釋18 倍,使之濃度為0.1mol/L略高。這種稀釋18倍后的Folin 試劑乙就是上文稱(chēng)之為的“應(yīng)用液”。Folin試劑乙貯備 液濃度的標(biāo)定,一般是以酚酞為指示劑。用Folin試劑乙去滴定1mol/L左右的標(biāo)準(zhǔn)氫氧化鈉溶液,當(dāng)溶液顏色由紅變?yōu)樽匣遥偻蝗蛔兂赡G即為終點(diǎn),如果用氫氧化鈉去滴定Folin試劑乙,終點(diǎn)不太好掌握,溶液地顏色是由淺黃變?yōu)闇\綠,再變?yōu)榛易仙珵榻K點(diǎn)。

 

        8、DNS試劑 (3,5-二硝基水楊酸試劑) □配置方法 1.取3,5-二硝基水楊酸10g,加入2mol/L氫氧化鈉溶液200mL。2.將3,5-二硝基水楊酸溶解,然后加入酒石酸鉀鈉300g。 3. 待其*溶解,用去離子水稀釋至2000mL,棕色瓶保存。

 

        9、5%蔗糖溶液 □組份濃度 5% □配制量 1L □配置方法 稱(chēng)取蔗糖50g,用去離子水溶解定容至1L。

 

        10、0.1mol/L蔗糖溶液 □組份濃度 0.1mol/L □配制量 1L □配置方法 稱(chēng)取蔗糖34.230g,用去離子水溶解并定容至1L。

 

        11、20%乙酸溶液 □組份濃度 20% □配制量 1.2L □配置方法 量取冰乙酸300mL,用去離子水稀釋至1200mL。

 

        12、30%(W/V)Acrylamide □組份濃度 30%(W/V)Acrylamide 0.05% □配制量 1L □配置方法 1.稱(chēng)量下列試劑,置于1L燒杯中 Acrylamide 290g 、BIS 10g 2.向燒杯中加入約600mL的去離子水,充分?jǐn)嚢枞芙?3.加入去離子水將溶液定容至1L,用0.45μm濾膜濾去雜質(zhì)。 4.于棕色瓶中低溫保存箱4℃保存。 注意:丙稀銑胺具有很強(qiáng)的神經(jīng)毒性,并可通過(guò)皮膚吸收,其作用有積累性,配制時(shí)應(yīng)戴手套等。聚丙烯酰胺無(wú)毒,但也應(yīng)謹(jǐn)慎操作,因?yàn)橛锌赡芎猩倭康奈淳酆铣煞荨?/p>

 

        13、40%(W/V)Acrylamide □組份濃度 40%(W/V)Acrylamide 0.05% □配制量 1L □配置方法 1.稱(chēng)量下列試劑,置于1L燒杯中 Acrylamide 380g、BIS 20g 2.向燒杯中加入約600mL的去離子水,充分?jǐn)嚢枞芙?3.加入去離子水將溶液定容至1L,用0.45μm濾膜濾去雜質(zhì)。 4.于棕色瓶中4℃保存。 注意:丙稀銑胺具有很強(qiáng)的神經(jīng)毒性,并可通過(guò)皮膚吸收, 其作用有積累性,配制時(shí)應(yīng)戴手套等。聚丙烯酰胺無(wú)毒,但也應(yīng)謹(jǐn)慎操作,因?yàn)橛锌赡芎猩倭康奈淳酆铣煞荨?/p>

 

        14、10%(W/V)過(guò)硫酸銨 □組份濃度 10%(W/V)過(guò)硫酸銨 □配制量 10mL □配置方法 1.稱(chēng)取1g過(guò)硫酸銨。 2.加入10mL的去離子水后攪拌溶解。 3.貯存于4℃。 注意:10%過(guò)硫酸胺溶液在4℃保存時(shí)間可使用2周左右,超過(guò)期限會(huì)失去催化作用。

 

        15、考馬斯亮藍(lán)R-250染色液□組份濃度 0.1%(W/V)考馬斯亮藍(lán)R-250,25%(V/V)異丙醇, 10%(V/V)冰醋酸 □配制量 1L □配置方法 1.稱(chēng)取1g考馬斯亮藍(lán)R-250,置于1L燒杯中。 2.量取250mL的異丙醇加入上述燒杯中,攪拌溶解。 3.加入100mL的冰乙醋酸,均勻攪拌。 4.加入650mL的去離子水,均勻攪拌。 5.用濾紙出去顆粒物質(zhì)后,室溫保存。

 

        16、考馬斯亮藍(lán)染色脫色液 □組份濃度 10%(V/V)醋酸,5%(V/V)乙醇 □配制量 1L □配置方法 1.量取下列溶液,置于1L燒杯中。 醋酸100mL、 乙醇50mL 、H2O850mL 2.充分混合后使用。

 

        17、凝膠固定液 (SDS-PAGE銀氨染色用) □組份濃度 50%(V/V)甲醇,10%(V/V)醋酸 □配制量 100L □配置方法 1.量取下列溶液,置于1L燒杯中。 甲醇500mL 、醋酸 100mL 、H2O 400mL 2.均勻混合后室溫保存。

 

        18、凝膠處理液 (SDS-PAGE銀氨染色用) □組份濃度 50%(V/V)甲醇,10%(V/V)戊二醛 □配制量 1L □配置方法 1.量取下列溶液,置于1L燒杯中。 甲醇50mL 、 戊二醛 10mL 、H2O 40mL 2. 均勻混合后室溫保存。

 

        19、凝膠染色液 (SDS-PAGE銀氨染色用) □組份濃度 0.4%(W/V)硝酸銀,1%(V/V)濃氨水,0.04%(W/V)氫氧化鈉 □配制量 100L □配置方法 1.量取下列試劑,加入100~200mL試劑瓶中。 20%硝酸銀 2mL 濃氨水 1mL 4%氫氧化鈉 1mL H2O 96mL 2.均勻混合。該溶液應(yīng)為無(wú)色透明狀。如氨水濃度過(guò)低時(shí)溶液會(huì)呈現(xiàn)混濁狀,此時(shí)應(yīng)補(bǔ)加濃氨水,直至透明。 3.本染色液應(yīng)現(xiàn)用現(xiàn)配,不宜保存。

 

        20、顯影液 (SDS-PAGE銀氨染色用) □組份濃度 0.005%(V/V)檸檬酸,0.02%(V/V)甲醛 □配制量 1L □配置方法 1.稱(chēng)取下列試劑,置于1L試劑瓶中。 檸檬酸 50mg 甲醛 0.2mL 2.加入1L去離子水后,搖動(dòng)混合后溶解。 3.室溫保存。

 

        21、45%乙醇溶液 □組份濃度 45% □配制量 1L □配置方法 量取無(wú)水乙醇450mL,加入去離子水550mL,混勻。

 

        22、5%的十二烷基硫酸鈉溶液 (W/V) □組份濃度 5% □配制量 0.1L □配置方法 稱(chēng)取5.0g十二烷基硫酸鈉,溶于100mL4%的乙醇溶液中。

 

        23、三氯甲烷-異戊醇混合試劑 □配置方法 取500mL三氯甲烷試劑,加入21mL異戊醇試劑,混勻。

 

        24、1.6%乙醛溶液 □組份濃度 1.6% □配制量 0.1L □配置方法 取47%乙醛3.4mL,用去離子水定容至100mL。

 

        25、二苯胺試劑 □配置方法 1.稱(chēng)取二苯胺試劑0.8g,溶解于180mL冰乙酸中, 2.再加入8mL高氯酸混勻。 3. 臨用前加入0.8mL 1.6%乙醛溶液。 注意:配制完成后試劑應(yīng)為無(wú)色。

 

        26、15%Chloroacetic acid溶液 □組份濃度 15% □配制量 2L □配置方法 稱(chēng)取Chloroacetic acid300g,用去離子水溶解定容至2000mL。

 

        27、1%谷氨酸溶液 □組份濃度 1% □配制量 0.5L □配置方法 1.稱(chēng)取5g谷氨酸,先用適量得用去離子水溶解。 2. 再用氫氧化鉀溶液中和至中性。 3. MAX后用去離子水定容至0.5L。

 

        28、1%丙酮酸溶液 □組份濃度 1% □配制量 0.5L □配置方法 1.稱(chēng)取5g丙氨酸,先用適量得用去離子水溶解。 2. 再用氫氧化鉀溶液中和至中性。 3. MAX后用去離子水定容至0.5L。

 

        29、0.1%的碳酸氫鉀溶液 □組份濃度 0.1% □配制量 0.5L □配置方法 稱(chēng)取碳酸氫鉀0.5g,用去離子水溶解定容至0.5L。

 

        30、0.05%的碘乙酸溶液 □組份濃度 0.05% □配制量 0.25L □配置方法 稱(chēng)取0.125g碘乙酸,用去離子水溶解定容至0.25L。

 

        31、Locke氏溶液 □配制量 2L □配置方法 稱(chēng)取18g氯化鈉,0.84gKCl,0.48g氯化鈣,0.3g碳酸氫鈉,2g葡萄糖,用去離子水溶解定容至2000mL。

 

        32、0.2mol/L的丁酸溶液 □組份濃度 0.2mol/L □配制量 1L □配置方法 1.量取18mL正丁酸試劑。 2.用1mol/L的氫氧化鈉中和。 3.再用去離子水定容至1L。

 

        33、0.1mol/L的硫代硫酸鈉溶液 □組份濃度 0.1mol/L □配制量 10L □配置方法 稱(chēng)248.17g硫代硫酸鈉,用去離子水溶解并定至10L。

 

        34、0.1mol/L的碘溶液 □組份濃度 0.1mol/L □配制量 1L □配置方法 1.稱(chēng)取碘12.7g和碘化鉀25g。 2.用去離子水溶解并定容至1L。 3.用0.1mol/L的硫代硫酸鈉標(biāo)定。

 

        35、10%氫氧化鈉溶液 □組份濃度 10% □配制量 2L □配置方法 稱(chēng)取200g氫氧化鈉,用去離子水溶解并定容至2L。

 

        36、10%鹽酸溶液 □組份濃度 10% □配制量 0.2L □配置方法 量取濃鹽酸49.3mL,用去離子水定至0.2mL。

 

        37、0.1%標(biāo)準(zhǔn)丙氨酸溶液 □組份濃度 0.1% □配制量 0.5L □配置方法 稱(chēng)取丙氨酸0.5g,用去離子水溶解并定容至0.5mL。

 

        38、0.1%標(biāo)準(zhǔn)谷氨酸溶液 □組份濃度 0.1% □配制量 0.5L □配置方法 稱(chēng)取谷氨酸0.5g,用去離子水溶解并定容至500mL。

 

        39、0.1%水合茚三酮乙醇溶液 □組份濃度 0.1% □配制量 1L □配置方法 稱(chēng)取1g水合茚三酮試劑,溶于1000mL無(wú)水乙醇中。

 

        40、酚溶液 □配置方法 在大燒杯中加入80mL去離子水,再加入300g 苯酚,在水 浴中加熱攪拌、混合至苯酚*溶解。將該溶液倒入盛有200mL去離子水的1000mL分液漏斗內(nèi),輕輕振蕩混合,使其成為乳狀液。靜止7~10小時(shí),乳狀液變成兩層透明溶液,下層為被水飽和的酚溶液,放出下層,貯存于棕色瓶中備用。

 

        41、0.5%淀粉溶液 □組份濃度 0.5% □配制量 0.1L □配置方法 稱(chēng)取淀粉0.5g,用去離子水溶解定容至0.1L。

 

        42、對(duì)羥基聯(lián)苯試劑 □配置方法 稱(chēng)取對(duì)羥基聯(lián)苯1.5g,溶于100mL0.5%氫氧化鈉溶液中,配制成1.5%的溶液。若對(duì)羥基聯(lián)苯顏色較深,應(yīng)用丙酮或無(wú)水乙醇重結(jié)晶,放置時(shí)間較長(zhǎng)后,會(huì)出項(xiàng)針狀結(jié)晶,應(yīng)搖勻后使用。

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