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用光照培養箱做種子發芽測定方法試驗

更新時間:2022-05-17  |  點擊率:1329

       1.測定樣品的提取用四分法從凈度測定合格的純凈種子,每個三角形中數取25粒種子組成100粒,共組成四個100粒,即為四次重復,分別裝入紗布袋中。

       2.消毒滅菌為了預防霉菌感染,干擾檢驗結果,檢驗所使用的種子和各種物件一般都要經過消毒滅菌處理。

       (1)檢驗用具的消毒滅菌:發芽盒、紗布、小鑷子仔細洗凈,并用沸水煮5~10分鐘,供發芽試驗用的發芽箱用噴霧器噴灑福爾馬林后密封兩三天然后使用。

       (2)種子的消毒滅菌:目前常用的藥劑有福爾馬林、高錳酸鉀。藥劑種類不同,處理的方法和時間也不一致。

福爾馬林:將紗布袋連同其中的種子測定樣品放人小燒杯中。注入0. 15%的福爾馬林溶液以浸沒種子為度,隨即蓋好燒杯。20分鐘取出絞干,置于有蓋的玻璃皿中悶30分鐘,取出后連同紗布用清水沖洗數次,即可進行浸種處理。

高錳酸鉀:用0.2%~0.5%的高錳酸鉀溶液浸2小時,取出用清水沖洗數次。

       3.浸種多數藥用植物種子不必浸種處理,但是如落葉松、馬尾松、側柏、黃連木、胡枝子等,用始溫為45℃水浸種24小時,刺槐種子用80~90℃熱水浸種,待水冷卻后放置24小時,浸種所用的水最好更換1~2次。

       4.發芽床的準備發芽床是為種子發芽和發芽初期幼苗生長發育提供襯墊的發芽基質。發芽床種類較多,但標準發芽實驗主要選用的是紙床和沙床。土壤或其他介質不宜用作初次試驗的發芽床。

       紙床多用于中小粒種子的發芽試驗,要求具有一定的強度、質地好、吸水性強、保水性好、無毒無菌、清潔干凈,不含可溶性色素或其他化學物質,pH值為6.0~7.5。

       可以用濾紙、吸水紙等作為紙床。

       有紙上或紙間兩種置種方式。紙上是將兩層或多層紙放于透明的培養皿,發芽盤或塑料盒里,然后將種子放在充分濕潤的紙上蓋好蓋子,放入發芽箱或發芽室進行發芽試驗。

       紙間方法有蓋紙法和紙巾卷法等幾種使用方法。蓋紙法:先將種子放在兩層濕潤紙上,然后再在上面輕輕蓋上1層濕潤紙;紙巾卷法:先將種子均勻排列在一層或兩層濕潤紙上,在種子上面蓋上1層同樣大小的濕潤紙,然后卷成筒狀,兩端用橡皮筋綁好,放于保濕盒里或塑料袋內,平放或立放發芽。

       沙床要求沙粒大小均勻,其直徑為0. 05~0. 80mm。無毒無菌無種子。持水力強,pH為6.0~7.5。使用前必須進行洗滌和高溫消毒。

       化學藥品處理過的種子樣品發芽所用的沙子,不再重復使用。

       沙床也有沙上或沙中兩種置種方式。沙上是把種子壓入厚2~3cm濕潤沙的表層;沙中則是將種子播在厚2~4cm的濕沙上,再按種子大小覆蓋上一層12cm厚度的濕沙。

       注意:發芽床、培養皿等用具使用前應洗凈或消毒。

       5.置床將經過消毒滅菌、浸種的種子安放到發芽床上。每個發芽盒床上整齊地安放1個重復的種子,種粒之間保持的距離大約相當于種粒本身的1~4倍,以減少霉菌感染,種粒的排放應有一定的規則,此外,要求每粒種子均充分接觸水分,從而使其吸水一致,發芽整齊。在發芽盒不易磨損的地方貼上小標簽,寫明送檢樣品號、重復號、姓名和置床日期,然后將發芽盒蓋好放入能調控溫度、光照的光照培養箱內。

       6.管理經常檢查測定樣品及其水分、通氣、溫度、光照條件。發芽所用溫度執行GB2772-1999中的規定。輕微發霉的種粒可以揀出用清水沖洗后放回原發芽床。發霉種粒較多的要及時更換發芽床或發芽容器。

       7.觀察記載發芽測定的情況要定期觀察記載。觀察記載的間隔時間根據不同藥用植物和樣品情況自行確定,但初次記數和末次記數必須有記載。

發芽測定持續時間為末次計數天數,自置床之日起算,不包括預處理時間。

記載項目按發芽床的編號依次記載以下各點

       8.計算發芽率和發芽勢

       發芽率(%)=(n/N)×100%

       式中:n為最終達到的正常發芽粒數;N為供試種子數。

       發芽率按組計算,然后計算四組的算術平均值。

       發芽勢(%)=(n/N)×100%

       式中:n為規定時間內正常發芽粒數;N為供試種子數。


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